ΦΑΣΜΑΤΟΣΚΟΠΙΑ-ΦΑΣΜΑΤΟΜΕΤΡΙΑ

Στόχοι Μαθήματος

1. Γνώση των διαφορών των φασμάτων υπεριώδους, υπερύθρου και ορατού.
2. Κατανόηση του μεγίστου μήκους κύματος απορρόφησης μιας ουσίας, λmax
3. Διατύπωση και κατανόηση των συνεπειών του νόμου των Bouget-Lambert-Beer (BLB).
4. Γνώση και σχέση μεταξύ απορροφητικότητας (Α) ή οπτικής πυκνότητας (OD) και διαπερατότητας (Τ).
5. Τι εκφράζει ο συντελεστής μοριακής απορροφητικότητας, Εm, ποιές είναι οι μονάδες μέτρησης και ποιά είναι η σημασία του στη φασματοσκοπία.
6. Αποκλείσεις από τον νόμο των BLB
7. Τι είναι η καμπύλη φάσματος απορρόφησης και πως μετράται.
8. Τι είναι και πως κατασκευάζεται η πρότυπη καμπύλη απορρόφησης.
9. Κατανόηση της γενικής λειτουργίας του φωτόμετρου.
10. Πως μετράται η συγκέντρωση άγνωστης ουσίας με βάση την πρότυπη καμπύλη της.


Στοιχειώδης εισαγωγή 5 σελιδων στις αρχές της φασματοσκοπίας
http://web.mit.edu/5.33/www/lec/spec1.pdf

http://linus.chem.ku.edu/genchemlab/1902015/Introduction%20to%20Spectroscopy%20Chemistry%20185%20Fall%202012.pdf


ΥΠΟΔΕΙΓΜΑΤΙΚΕΣ ΑΣΚΗΣΕΙΣ ΚΑΙ ΠΡΟΒΛΗΜΑΤΑ

1. Να υπολογιστεί η απορροφητικότητα, Α, διαλύματος της πρωτεϊνης κυτοχρώματος C. Δίνονται: l=1 cm, c=0,5 mg/ml, Em=153000 1/M 1/cm και MB=13370 g/mol. 

2. Διαλυμα καθαρής αλβουμίνης χρησιμοποιήθηκε για την κατασκευή πρότυπης καμπύλης (με την μέθοδο προσδιορισμού της συγκέντρωσης πρωτεϊνών κατά Lowry) και έδωσε τα πιο κάτω αποτελέσματα.

BSA (Αλβουμίνη), μg/μl         0        20             40           60          80           100
A                                             0        0,05          0,10         0,15      0,20         0,23

Κατασκευάστε την πρότυπη καμπύλη.

α) Ποιά συγέντρωση έδωσε Α=0.12
β) Ποιά είναι η συγκέντρωση του διαλύματος όταν Α=0,25


ΕΡΩΤΗΣΕΙΣ ΑΝΑΣΚΟΠΗΣΗΣ

 1. Δώστε τους οριμμούς της απορροφητικότητας (Α), του φάσματος Α, της μοριακής απορροφητικότητας Εm και της διαπερτότητας.

2. Εξηγείστε γιατί η απορροφητικότητα είναι αδιάστατο μέγεθος.

3. Ποιές είναι οι διαστάσεις της Em ;

4. Σε ποιό νόμο στηρίζεται η φασματομετρία ;

ΕΡΩΤΗΣΕΙΣ ΚΡΙΣΕΩΣ

1. Παρ' όλο που η απορροφούμενη ηλεκτρομαγνητική ενέργεια των φωτονίων (hv) είναι κβαντισμένη, τα φάσματα απορρόφησης είναι συνεχή. Να εξηγήσετε γιατί.

2. Ο συντελεστής Em εκφραζεται σε L/mol/cm. Από τί εξαρτώννται οι μονάδες του Em ;

3. Ποιά είναι η Α διαλύματος ουσίας όταν l=1 cm και Em=3782 L/mol/cm ;

4. Πως η Em μιας ουσίας επηρεάζει τη ευαισθησία του φασματοφωτομέτρου ;

5. Έχετε δυο ουσίες με Em ίσο με 10000 και 20 αντίστοιχα: Ποιά είναι πιο έυκολο να ανιχνευτεί αι γιατί ;

5. Ποιά η σημασία της Em στην φασματομετρία ;

ΛΙΠΟΠΡΩΤΕΪΝΕΣ ΑΙΜΑΤΟΣ

Τι πρέπει να γνωρίζετε:

1. Σύσταση και δομή λιποπρωτεϊνών. Με ποιές 2 μεθόδους ταξινομήθηκαν;

2. Πως διαφέρουν οι HDL, LDL, VLDL IDL (πίνακας 1, σελ. 83) ;

3. Ποιοί είναι οι κύριοι παράγοντες κινδύνου αθηροσκλήρυνσης και καρδιαγγειακών νοσημάτων (σελ. 82);

4. Κατανόηση των πινάκων Ι (σελ. 83) και ΙΙ (σελ. 85).

5. Ποιοί είναι οι κύριοι τύποι λιπρωτεϊνικών φαινοτύπων και πως διαφέρουν;

 

Οι πιο κάτω αναφορές περιέχουν περισσότερες λεπτομέρειες, ιδιαίτερα στον μεταβολισμό των λιποπρωτεϊνών για όσους ενδιαφέρονται περαιτέρω.

1) Λιποπρωτεϊνες και Αθηροσκλήρυνση (Ελληνιστί)

2) Σύσταση, δομή και μεταβολισμός λιποπρωτεϊνών (Αγγλιστί)


Επίσης, 2 βιντεο επισκόπησης στο youtube:

1) Μεταβολισμός Λιποπρωτεϊνών 

2) Νέες έννοιες στην αθηροσκλήρυνση 
  

ΠΟΣΟΤΙΚΟΣ ΠΡΟΣΔΙΟΡΙΣΜΟΣ ΓΛΥΚΟΖΗΣ/ΚΕΤΟΝΟΣΩΜΑΤΩΝ

Τι πρέπει να γνωρίζετε:

1. Σακχαρώδης Διαβήτης: Διάγνωση και ταξινόμηση

2. Δοκιμασία ανοχής της γλυκόζης

ΦΑΣΜΑΤΟΣΚΟΠΙΑ ΚΑΙ ΦΑΣΜΑΤΟΜΕΤΡΙΑ

Τι πρέπει νβα γνωρίζετε:

1) Περιγραφή ηλεκτρομαγνητικών ακτινοβολιών και αλληλεπιδραση με την ύλη:   
    Σημειώσεις*
2) Σχέση ενέργειας, μήκους κύματος και συχνότητας: Σημειώσεις 
3) Μοριακή απορρόφηση: Σημειώσεις
4) Νόμος Bouget-Lambert-Beer: Σημειώσεις και βιβλίο, σελ. 11-12
5) Σχέση απορροφητικότητας/διαπερατότητας
6) Συντελεστής μοριακής απορροφητικότητας (Εm): Σημειώσεις και βιβλίο, σελ. 11
    Ποιά είναι η σημασία της Εm ;
    Πως υπολογίζουμε τον Εm μιας ένωσης ;
    
7) Ποσοτικές μετρήσεις απορροφητικότητας: Σημειώσεις 
    Μέτρηση με βάση τον Em.
    Συγκριτική μέθοδος (δίχως χρήση του Em)
8) Ανάλυση μιγμάτων, πχ. NAD+/NADH, Σημειώσεις και βιβλίο
   


*Θα παρουσιαστούν στην τάξη

ΣΗΜΕΙΩΣΕΙΣ ΣΤΗΝ ΚΛΙΝΙΚΗ ΔΙΑΤΡΟΦΗ

ΡΥΘΜΙΣΤΙΚΑ ΔΙΑΛΥΜΑΤΑ και pH - Ασκήσεις και προβλήματα

Ασκήσεις και προβλήματα

ΒΙΟΧΗΜΙΚΗ ΔΙΕΡΕΎΝΗΣΗ ΛΕΙΤΟΥΡΓΙΑΣ ΙΣΤΩΝ ΚΑΙ ΟΡΓΑΝΩΝ

Αυτό είναι το τελευταίο εργαστήριο για φέτος. Η ύλη βρίσκεται στις σελ. 94-105 του εργαστηριακού βιβλίου. Είναι σημαντικό να μελετήσετε την ύλη πριν έρθετε στο εργαστήριο.

Εκτελεστέα Πειράματα: 1, 2 και 4, σελ. 99-102